抽提植物基因組DNA

主要由CTAB、氯化鈉、EDTA等組成,附送 2-巰基乙醇,臨用前按比例加入。
儲存條件：室溫,24個(gè)月

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

從植物組織中制備基因組DNA較常采用的方法有氯化離心法、CTAB抽提法等，CTAB抽提法是經(jīng)典的植物DNA提取法，可以用于多種不同類(lèi)型植物樣品DNA的提取，獲得的量很高，但是純度一般，但是足夠用于大多數分子生物學(xué)實(shí)驗。

CTAB抽提液的有效成分為CTAB(十六烷基三乙基溴化銨)，臨用前加入2-ME，使其更有效，更穩定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途

自備材料：

1、液氮\研缽或勻漿器、離心管、恒溫箱或水浴鍋、離心機

2、氯仿/異戊醇(24:1)、高鹽TE緩沖液、異丙醇、75%乙醇、TE緩沖液

操作步驟(僅供參考)：

1、取5ml適量的CTAB抽提液，按CTAB抽提液：2-ME=50：1的比例混勻，置于15ml或其他規格的離心管中，60℃預熱；如有必要可加入1～5μg/ml的RNaseA，以便去除殘余的RNA。

2、稱(chēng)取1～1.5g或適量新鮮植物組織或葉片，用預冷的液氮或干冰冷卻研缽或勻漿器，將新鮮植物組織或葉片粉碎成細粉末，將冷凍的組織轉移至離心管中。

3、向粉碎后的組織中按4～5ml/g加入預熱的CTAB抽提液，充分混勻，65℃溫育15～60min，并不時(shí)混勻。

4、加入等體積氯仿/異戊醇(24:1)，顛倒充分混勻，8000g離心5～10min，回收上層水相(即上清液，該上清液中含有所需DNA)。

5、轉移上清液，加入1/2～2/3體積預冷的異丙醇，輕輕混勻，室溫靜置使核酸沉至管底；如果觀(guān)察不到沉淀，可在室溫下靜置數小時(shí)至過(guò)夜。2000g離心2min，輕輕棄上清液。

6、在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇，室溫靜置20min，4000g離心10min，輕輕棄上清液。

7、自然干燥DNA，加入適量去離子水或TE緩沖液，-20℃保存。

注意事項：

1、如果每次的使用量很小，可以適當分裝后再使用。

2、試劑如有絮狀沉淀，可于50~75℃水浴中助溶，如仍有大量沉淀應棄用。

3、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。